Baculovirus: isolement d'un clone non défectif à partir d'une plaque de lyse.
Sélection d'un clone et amplification pour inoculum.
Service de purifications de clones baculoviraux
L'amplification successive peu amener à l'apparition de particules baculovirales defectives. Au bout d'un certain nombre de passages celles-ci peuvent surpasser, les particules non défectives, engendrant des baisses importantes de rendement dans l'expression de protéines
À partir de votre surnageant de votre baculovirus, nous pouvons purifier par la méthode d'essai sur plaque sur un tapis cellules d'insectes. Les cellules sont recouvertes d’un milieu solide pour limiter la propagation des particules virales.
Après plusieurs cycles d'infection, des plaques de lyses se forment. On considère que chaque plage de lyse est issue d'un clone viral.
La répétition de cet isolement du virus clonal est nécessaire pour garantir l'élimination des virions défectueux afin de produire un stock infectieux ayant des rendements optimums.
La méthode de purification d'un clone viral par plaques essais
Temps nécessaire (3 à 4 semaines)
Délivrable: 1ml de clone purifié infectieux
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